作者: Connie R. Mahon 着
出版社: Oversea Publishing House
出版年: 2006-09-01
页数: 1211
定价: 694
装帧:精装
ISBN: 9781416025818

检测HIV感染者体液中病毒抗原和抗体的方法，操作方便，易于普及套用，其中抗体检测尤普通。但HIv P24抗原和病毒基因的测定，在HIV感染检测中的地位和重要性也日益受到重视。

（一）抗体检测

主要有酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫萤光试验（IFA）。ELISA用去污剂裂解HIV或感染细胞液提取物作抗原，IFA用感染细胞涂片作抗原进行抗体检测，如果发现阳性标本应重複一次。为防止假阳性，可做Western blot （WB，蛋白印迹法）进一步确证。

WB法是用聚丙烯醯胺凝胶电泳将HIV蛋白进行分离，再经传移电泳将不同蛋白条带转移于硝酸纤维膜上，加入病人血清孵育后，用抗人球蛋白酶标抗体染色，就能测出针对不同结构蛋白抗体，如抗gp120、gp41、P24抗体，特异性较高。

（二）抗原检测

用ELISA检测P24抗原，在HIV感染早期尚未出现抗体时，血中就有该抗原存在。由于P24量太少，阳性率通常较低。现有用解离免疫複合物法或浓缩P24抗原，来提高敏感性。

（三）核酸检测

用PCR法检测HIV基因，具有快速、高效、敏感和特异等优点医学教育网蒐集|整理，目前该法已被套用于HIV感染早期诊断及爱滋病的研究中。

（四）病毒分离

常用方法为共培养法，即用正常人外周血液分离单个核细胞，加PHA刺激并培养后，加入病人单个核细胞诊断及爱滋病的研究中。

本菌A型所致气性坏疽及人食物中毒的微生物学诊断，主要依靠细菌分离鉴定。其余各型所致的各种疾病，均系细菌在肠道内产生毒素所致，细菌本身不一定侵人机体;同时正常人畜肠道中常有此菌存在，在非本菌致死的动物也很容易于死后被此菌侵染。因此，从病料中检出该菌，并不能说明它就是病原。所以细菌学检查只有当分离到毒力强大的此菌时，才具有一定的参考意义。鉴定本菌的要点为:厌氧生长、菌落整齐、生长快、革兰氏阳性粗桿菌、不运动，有双层溶血环，引起牛奶暴烈发酵，胸肌注射鸽越夜死亡，胸肌涂片可见有荚膜的菌体。

有效微生物学诊断方法是肠内容物毒素检查。其方法为取迴肠内容物，如採集量不够，可再采空肠后段或结肠前段内容物，加适量灭菌生理盐水稀释，经离心沉澱后取上清液分成两份，一份不加热，一份加热 (60℃30min)，分别静脉注射家兔 (1～3m1)或小鼠(0.1～0.3m1)。如有毒素存在，不加热组动物常于数分钟至十数小时内死亡，而加热组动物不死亡。

为确定致死动物的毒素类别及其细菌型别，须进一步做毒素中和保护试验。其方法为将前述上清液分为6份，分别加入适量此菌各型抗毒素及生理盐水 (对照)，混合均匀后在37℃下作用40min，然后各静脉注射小鼠或家兔一组，观察24h，记录各组动物的死亡及存活情况，并按表22-7判定菌型。由于B型与D型的E毒素和E型的。毒素都是毒素前体，只有经过胰酶激活后才显示出毒力。故不经胰酶处理时，A型血清也能保护D、E型毒素，B型血清可保护E型毒素，C型血清能保护B、D、E型毒素。然而，胰酶处理后再进行中和试验，可因α毒素及β毒素遭到破坏或部分破坏，实验结果有时可能不确切。

採集病料

为了準确的微生物学诊断结果，首先必须正确地採集病料，只能从濒死亡或死亡几小时内的家禽中採取病料，以使病料新鲜，应按无菌操作的要求进行，用具应严格消毒，可根据对临床初步诊断所怀疑的若干种疾病，作确诊或鉴别诊断时应检查的项目来确定採集病料的种类。较易採取的病料是血液、肝、脾、肺、肾、脑、腹水、心包液、关节滑液等。

涂片镜检

少数的传染病，例如麴霉菌病等，可通过採集病料直接涂片镜检而作出确诊。

病原的分离培养与鉴定

可用人工培养的方法将病原从病料中分离出来，细菌、真菌、霉形体和病毒需要用不同的方法分离培养，例如使用普通培养基、特殊培养基、细胞、禽胚和敏感动物等，对已分离出来的病原，还需要作形态学、理化特性、毒力和免疫学等方面的鉴定，以确定致病病原物的种属和血清型等。

动物接种试验

如一些有明显临床症状或病理变化的禽病，可将病料作适当处理后接种敏感的同种动物或对可疑疾病最为敏感的动物。将接种后出现的症状，死亡率和病理变化与原来的疾病作比较，作为诊断的论据，必要时可从病死家禽中採集病料，再作涂片镜检和分离鉴定。较常使用的实验动物是鸡、鹅、鸭、家兔、小白鼠等。

免疫学诊断

根据抗原与抗体的特异性反应的原理可以用已知的抗原检测未知的抗体，也可用已知的抗体检测未知的抗原，目前较常使用的有血凝试验与血凝抑制试验，沉澱试验、中和试验、溶细胞试验、补体结合试验、以及免疫酶技术免疫萤光技术，和放射免疫等，可根据需要和可能进行某些项目的试验。