β-澱粉酶(β-amylase)，又称澱粉β-1,4-麦芽糖苷酶，是澱粉酶类中的一种，广泛存在于大麦、小麦、甘薯、大豆等高等植物以及芽孢桿菌属等微生物中。是啤酒酿造、饴糖(麦芽糖浆)製造的主要糖化剂。利用诸如多黏芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌等微生物产生的β-澱粉酶糖化已经酸化或α-澱粉酶液化后的澱粉原料，可以生产麦芽糖含量60%~70%的高麦芽糖浆。
性质
能将直链澱粉分解成麦芽糖的澱粉酶。广布于植物界如未发芽的大麦、小麦、燕麦、大豆、甘薯等中。可耐酸。将麦芽汁调节pH值为3.6，在0℃下可使α-澱粉酶失去活力，而余下β-澱粉酶。β-澱粉酶的唯一产物是麦芽糖，不是葡萄糖。
酶的来源
β-澱粉酶主要存在于高等植物中，特别是穀物中，如大麦、小麦等，在甘薯、大豆中也有存在，在动物体内不存在。目前工业上使用的β-澱粉酶主要包括植物β-澱粉酶和微生物β-澱粉酶。
由于植物来源的β-澱粉酶生产成本较高，人们也开始重视微生物来源的β-澱粉酶，从20世纪60年代开始，已先后发现了来源于巨大芽孢桿菌、多黏芽孢桿
菌及蜡状芽孢桿菌的β-澱粉酶，但它们的耐热性低于植物β-澱粉酶。
酶的性质
β-澱粉酶活性中心含有巯基(-SH)，因此，一些氧化剂、重金属离子以及巯基试剂均可使其失活，而还原性的谷胱甘肽、半胱氨酸对其有保护作用。β-澱粉酶和α-澱粉酶的最适pH值範围基本相同，一般均在5.0~6.5左右，但β-澱粉酶的稳定性明显低于α-澱粉酶，70℃以上一般均会失活。不同来源的β-澱粉酶稳定性也有较大差异，大豆β-澱粉酶最适作用温度为60℃左右，大麦β-澱粉酶最适作用温度为50~55℃，而细菌β-澱粉酶最适作用温度一般低于50℃。
酶的作用形式
β-澱粉酶是一种外切型澱粉酶，它作用于澱粉时从非还原性末端依次切开相隔的α-1,4键，水解产物全为麦芽糖。由于该澱粉酶在水解过程中将水解产物麦芽糖分子中C1的构型由α型转变为β型，所以称为β-澱粉酶。
β-澱粉酶不能水解支链澱粉的α-1,6键，也不能跨过分支点继续水解，故水解支链澱粉是不完全的，残留下大分子的β-极限糊精。β-澱粉酶水解直链澱粉时，如澱粉分子由偶数个葡萄糖单位组成，则最终水解产物全部是麦芽糖；如澱粉分子由奇数个葡萄糖单位组成，则最终水解产物除麦芽糖外，还有少量葡萄糖。β-澱粉酶水解澱粉时，由于从分子末端开始，总有大分子存在，因此黏度下降很慢，不能作为液化酶使用，而β-澱粉酶水解澱粉水解产物如麦芽糊精、麦芽低聚糖时，水解速度很快，故作为糖化酶使用。