反相高效液相色谱，狭义上指的是固定相颗粒表面为非极性材料（如含C18链）,流动相为极性的一种高效液相色谱。广义上只要流动相的极性大于固定相极性的高效液相色谱，都可以叫做反相液相色谱。通过这类反相层析柱的分子按其极性大小移动，极性越大移动越快。